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动物行为试验攻略丨捕食者气味诱导的先天惊骇行为相关范式
来源:欧宝娱乐app在线入口 发布时间:2026-01-23 03:42:36
先天惊骇是动物和人类逃避风险的天然反响,啮齿类动物主要是经过嗅觉体系感知捕食者气味(如狐狸粪便成分),发生自动逃避和被迫僵住两种中心行为,以坚持生计和心理健康。
该测验是研讨nTMT诱导小鼠先天惊骇行为的中心,分为“逃避行为记载”和“逃避行为量化”两部分,中心是经过3D运动捕捉追寻小鼠对nTMT的自动逃避反响。
测验空间:圆形开阔场(高度40cm、直径50cm),四角设备4台高清数字相机以30帧/秒的速率记载小鼠行为,保证捕捉行为细节的连续性和准确性。
影响物处理:将蘸有未稀释nTMT的滤纸置于密封盒中(防止操作时走漏),试验时放在小鼠的对侧方位,作为先天惊骇影响源。
嗅觉逃避测验(Olfactory avoiding test):聚集小鼠对nTMT的即时逃避动作,判别根据包含小鼠的鼻尖朝向、与滤纸的接近动作及间隔。当小鼠鼻尖与滤纸中心的间隔超越20mm时,记为“逃避信号开端”;当小鼠鼻尖朝向发生改动(不再远离滤纸)时,记为“逃避信号完毕”,以此界定单次逃避行为的时刻窗口。
僵住时刻(Freezing time):经过追寻小鼠身体上16个特征点,将小鼠除呼吸外坚持停止超越3秒的时长界说为僵住时刻,反映被迫惊骇反响。
逃避指数(Avoidance index):用于标准化逃避时刻,计算公式为“逃避指数=(P-50)/50”,其间P是小鼠在测验时刻内(10分钟)处于无滤纸区的时刻占比(百分比),该指数可消除个别活动差异对成果的影响,更精准比较不同组小鼠的逃避程度。
对照验证:为扫除气味特异性搅扰,选用相同方法测验小鼠对花生酱(偏好气味)和2-庚酮(中性气味)的反响,比照剖析nTMT诱导行为的特殊性。
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该测验用于评价对小鼠嗅觉联想回想的影响,中心是运用小鼠“气味-食物”的先天联想才能,经过三阶段试验量化回想才能改动。
试验设计逻辑:根据小鼠先天能经过气味寻觅食物的特性,经过“习惯-练习-回想”三阶段,调查小鼠是否联想回想受损。
习惯阶段(Habituation phase):在40×40×30cm的开阔场中放置两个相同物体,将小鼠从远离物体的侧边中心放入,让其习惯环境10分钟(第1天),消除对测验空间和物体的生疏感。
练习阶段(Training phase):在两个物体上别离放置相同奶酪(一个置于物体顶部,躲藏但可发出气味;一个置于另一个物体后方),每天练习小鼠10分钟,继续6天,让小鼠树立“特定物置-奶酪气味”的联想。
回想阶段(Recall phase):第8天移除奶酪,进行行为测验,记载小鼠抵达“曾放置奶酪方位”的时刻,该时刻被界说为“潜伏期(Latency)”潜伏期越长,阐明嗅觉联想回想越弱。
测验环境:在26×17×12cm的测验笼中铺设3cm厚的垫料,试验前让小鼠在笼中习惯10分钟;
影响物放置:将200mg食物颗粒埋在垫料下约0.5cm处,每次试验随机改动食物颗粒方位,并替换新鲜垫料,防止气味残留搅扰。
中心目标:记载小鼠从放入笼中到用前爪发现并抓取食物颗粒的时刻,即“寻食潜伏期”。潜伏期越长,阐明气味查验测验才能越弱(嗅觉阈值越高)。
对照试验:为扫除“运动才能或寻食动机改动”对成果的搅扰,在埋藏食物颗粒测验后进行“视觉食物颗粒测验”:将食物颗粒放在垫料外表,调查小鼠的寻食潜伏期,若两组(对照组vs试验组)无差异,则证明运动才能和动机正常,仅嗅觉查验测验才能有几率存在差异。
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呈现了小鼠在nTMT影响下的行为表现。A、D图是试验场景,B、C、E图经过间隔、速度等目标,展现小鼠在nTMT存在时会发生远离影响源等逃避行为,还会呈现僵住(Freezing)状况,体现出对捕食者气味的先天惊骇反响。
试验场景运用了3D运动捕捉和3D重建技能(3D motion-capture and 3D reconstruction)。具体来说,在一个圆形开阔场(高度40cm,直径50cm)中,在场所的四个旮旯装备了四台高清数字相机,以30帧每秒的速度记载小鼠的行为。经过这一些相机捕捉小鼠在场所中的运动信息,从而运用有关技能完成对小鼠行为的3D重建,以便后续准确剖析小鼠在面临影响(如捕食者气味nTMT)时的行为表现,例如移动轨道、与影响源的间隔等。
这种方法可以较为精准地追寻小鼠的行为改动,为研讨小鼠对捕食者气味的逃避和逃避等行为供给具体的数据支撑。
从行为视点深化了解动物对捕食者气味的反响机制,为进一步研讨人类惊骇相关行为(如焦虑症、伤口后应激妨碍等精神疾病中呈现的惊骇反响反常)的神经根底供给参阅,为相关疾病的干涉供给潜在靶点和医治思路。
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